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聚丙烯酰胺凝膠電泳和醋酸纖維薄膜電泳簡介

1591 人參與  2018年08月06日 11:08  分類 : 醫(yī)藥化學  評論

聚丙烯酰胺凝膠電泳和醋酸纖維薄膜電泳簡介
一、聚丙烯酰胺凝膠電泳:由于被電泳的物質(zhì)在圓柱形的支持物中電泳,形成不連續(xù)的圓盤形區(qū)帶,因而亦稱圓盤電泳。聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成的凝膠,是丙烯酰胺單體(ch2=chconh2>和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺(ch2=chconhch2nhcoch=ch2)在催化劑的作用下聚合而成的一種凝膠。經(jīng)聚合后的凝膠有一定的孔徑大小,而且這孔徑可以調(diào)節(jié),以適應各種不同電泳物的需要。因此聚丙烯酰胺電泳有分子篩和電泳的雙重作用,因而能將蛋白質(zhì)較細地分離。如人血淸蛋白紙上電泳可分成5?7個組分,聚丙烯酰胺凝膠電泳則可分成20?30個組分。在操作過程中較其他電泳方法為復雜,目前一般的臨床檢驗室使用尚少。但它具有高度的分辨能力,在醫(yī)療診斷上有一定的發(fā)展前途。
二、醋酸纖維薄膜電泳:醋酸纖維薄膜是醋酸纖維素溶于有機溶劑(如丙酮等),涂抹成均勻的薄膜??勺骷毦鸀V膜,也可在電泳上作支持物。由于醋酸纖維薄膜對蛋白質(zhì)吸附少,電泳沒有“拖尾”現(xiàn)象,各區(qū)帶分離清晰,而且能分離出在紙上不易分出的某些蛋白(如胎兒甲種球蛋白),電泳時間短等優(yōu)點。在臨床實驗室里已用來作血清蛋白、脂蛋白、血紅蛋白、同功酶等的分離。近年來國內(nèi)已有各種規(guī)格的醋酸纖維薄膜成品可供采用,無須自行制備。因而在臨床實驗室中醋酸纖維薄膜電泳越來越多應用。
三、瓊脂凝膠電泳即以瓊脂凝膠作為支持物進行電泳。因瓊脂凝膠中含有大董水分,對蛋白質(zhì)的吸附極微,幾乎無“拖尾”現(xiàn)象。電泳圖譜區(qū)帶整齊,界限清楚,重復性好,而且是透明的,可制成有彈性的干膜供長期保存。瓊脂凝膠甩作免疫電泳,進鑒別用其它方法所不能鑒別的復雜生物活性體系。故檢驗室除了用作血淸蛋白和脂蛋白電泳外,常用作對流免疫電泳,為某些診斷作常規(guī)檢査,這是由于它有快速、簡易等優(yōu)點。

四、紙上電泳:是臨床檢驗室最常用的方法。一般用作血淸蛋電泳、血紅蛋白電泳和脂蛋白電泳等。

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