影響蛋白電泳的因素

一個(gè)帶電的蛋白質(zhì)分子，其所以能在電場(chǎng)中移動(dòng)以及其具有一定的移動(dòng)速度，取決于其本身所帶的電荷、電場(chǎng)強(qiáng)度、溶液的PH、粘度和電滲等因索的影響。

一、帶電質(zhì)點(diǎn)所帶電荷：如上所說(shuō)蛋白質(zhì)由于綏沖液PH的不同，所帶的電荷可正可負(fù)，在電場(chǎng)里向相反的電極移動(dòng)。溶液的PH值離等電點(diǎn)越遠(yuǎn)，則移動(dòng)的速度越快。蛋白質(zhì)分子小而帶電多者，移動(dòng)速度較快。分子大而帶電少者移動(dòng)較慢。   
二、電場(chǎng)強(qiáng)度：電場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)電泳速度也起決定的作用，

所謂電場(chǎng)強(qiáng)度是每一厘米的電位降。例如濾紙電泳時(shí)，濾紙兩端長(zhǎng)為20厘米，測(cè)得的電位降為200伏特。則電場(chǎng)強(qiáng)度為200+20=10伏特/厘米。電場(chǎng)強(qiáng)度愈大，則帶電質(zhì)點(diǎn)移動(dòng)愈快。

三、溶液的離子強(qiáng)度：溶液的離子強(qiáng)度越高，則蛋白質(zhì)移動(dòng)的速度愈慢，而且紙上電泳圖譜各組分的距離縮短;反之，則移動(dòng)快，紙上電泳圖譜各組分的距離寬闊。紙上電泳綏沖液的離子強(qiáng)度一般是用0.02?0.1之間。

四、電滲：電滲是和電泳同時(shí)發(fā)生的一種副作用。區(qū)帶電泳的各種支持物（如濾紙、瓊脂等）不是絕對(duì)中性的，在緩沖液中或多或少帶有電荷。例如在紙上電泳的條件下，濾紙帶有負(fù)電荷，因而與紙相接觸的水溶液則帶正電荷。
這種在電場(chǎng)中液體對(duì)于一個(gè)固定的固體相對(duì)移動(dòng)的現(xiàn)象，稱(chēng)為電滲。此時(shí)進(jìn)行電泳血淸蛋白在紙上隨著電滲的液流向負(fù)極流動(dòng)。血淸蛋白本身最帶負(fù)電荷而向正極移動(dòng)，因此其速度由于電滲的影響而減慢。
假使質(zhì)點(diǎn)原是向負(fù)極移動(dòng)，則其電泳速度加快。電滲的液流是均勻而緩慢，只是將電泳圖譜中各個(gè)區(qū)帶以相同的速度街動(dòng)，因而對(duì)它們分離情況并沒(méi)有顯著的影響。
電滲的強(qiáng)弱決定于許多因素；綏沖液的pH濃度和濾紙的厚度，瓊脂的純度等都有影響。例如厚的濾紙和離子強(qiáng)度較低的綏沖液都可使電滲增加。瓊脂的來(lái)源和凈化的程度，對(duì)電滲很有關(guān)系。
五、電泳遷移率：電泳速度以厘米2秒/伏特表示，稱(chēng)遷移率。除了質(zhì)點(diǎn)所帶的電荷量及電場(chǎng)的強(qiáng)度之外，質(zhì)點(diǎn)的形狀和緩沖液的粘度對(duì)電泳的移速也有影響。
六、蒸發(fā)：蒸發(fā)是紙上電泳的一個(gè)重要千擾因素。由于濾紙電阻大，因而通電時(shí)產(chǎn)生一定的熱鬼。如電壓增大，發(fā)熱更甚，濾紙上溶液的蒸發(fā)更多，產(chǎn)生紙上液流和綏沖液濃度增大，影響于血淸各種蛋白質(zhì)的分離。因此，在臨床檢驗(yàn)室的紙上電泳裝置，將濾紙置于密閉的電泳槽中，并且采用離子強(qiáng)度適當(dāng)小的緩沖液和較低的電壓和電流，使蒸發(fā)減弱不致影響各個(gè)蛋白組分的清晰分離。