蛋白紙上電泳的注意事項

血清蛋白電泳的影響因素較多，因此要得到重復性高的結果，操作條件要力求一致，注意操作的細節(jié)。

一、    濾紙盡量要采用同一品種、同一批號。濾紙選擇要求①質地厚，②對蛋白吸附力?。虎蹖θ玖衔搅π?，濾紙空白色淺，④濾紙條應順紋剪裁。

二、    血淸用毋要恒定，壬要過多。如用量過多，電泳圖譜可能分離不清楚。且蛋白與染料結合不呈平行，染色后白蛋白比例減少。

三、    通電后負極和正極兩端的綏沖液氫離子濃度略有改

變，故應每次電泳后，將電極調換位置，并在一定時間內全部緩沖液混勻過濾。滅少污染，控制水分蒸發(fā)和離子強度的改變，對電極上沉積的結晶及時處理，這樣可延長其使用時間。在電泳圖譜區(qū)帶分離不淸時，應考慮緩沖液是否須要更換。
壓高，電流大，電泳加速，時間可縮短，但產生熱效應大，濾紙上蒸發(fā)嚴重，使電泳圖譜短而不淸，故電壓電流不能無
限制地增大。
電壓、電流和電泳時間應通過實驗決定，不要硬性按照公式計算。

五、加熱固定的目的是使已分離的蛋白質不致擴散，同時使蛋自質牢固地結合在濾紙上，不致染色時脫落。但加熱固定時間和溫度，須前后一致，否則誤差較大。

電泳后濾紙條未烘干時，紙上有蛋白部分不能與任何物體接觸，烘干時也要平放。烘干后，未染色時，.不能有水點滴在紙上有蛋白部分，以免擾亂電泳圖譜。   
六、    各種蛋白質與同一種染料的親和力不一，同時各種染料對蛋白的結合力又不一。所以不同染料或相同染料而不同規(guī)格批號均可影響染色結果。染液中除染料外，尚有染料的溶劑（如乙醉）和蛋白質沉淀劑（硫柳汞、氣化汞等>。故染料的種類和染色的時間要前后一致。染色時最好用少量:染液浸染濾紙，染色后棄去。以免同一染液反復過多的浸染，導致染液中鹽'類濃度增加，pH升高和乙醉揮發(fā)等使白蛋白偏低。

七、    血清標本宜新鮮，不能及時檢驗時，冰箱中保存，不得超過3日，不可溶血。

由于鹽析法分離白蛋白與球蛋白時，有部分《球蛋白也包含在白蛋白部分內。故現用鹽析法的白蛋白和球蛋白比例與電泳分析不相一致，但不至有大差別。