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國(guó)際單位制的建立,洛伯特遜提出建立的絕對(duì)實(shí)用單位制米制在國(guó)際上的轉(zhuǎn)及促成了以米為基礎(chǔ)的許多單位制的建立,例如,1881年第1屆電學(xué)家會(huì)議?裉據(jù)髙斯(Guass)1832年的建議,決定采用CGS(厘米克秒)制,并且還通過(guò)了電學(xué)的“絕對(duì)實(shí)用”單位制,但“絕對(duì)實(shí)用”單位并未組戍一個(gè)完整的單位制,而只是絕對(duì)電磁單位的一些分?jǐn)?shù)單位和1倍數(shù)單位。由于以上的單位制只能反映電和磁現(xiàn)象在發(fā)展初期的水平,所以,意大利科學(xué)家G.喬吉(G.Giorgi)在1902年提出了MKSA(米千克秒安培)絕對(duì)實(shí)用單位制。1904年英國(guó)學(xué)者洛伯特遜(Robertson)又提出了由米、千克、秒和庫(kù)侖四個(gè)單位建立的絕對(duì)實(shí)用單位制.1925年法國(guó)提出MTS(米噸秒)制?在工程技術(shù)中還有MKGFS(米千克力秒)制?另
乙二胺四乙酸鹽的作用乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽)乙二胺四乙酸鹽與血中鈣絡(luò)合使鈣失去活性而使血液不凝結(jié)。用它作抗凝劑在短時(shí)間內(nèi)可保存白細(xì)胞增態(tài),能防止血小板凝集,可保存血小板。乙二胺四乙酸鹽可用它的鉀鹽、鈉鹽或鋰鹽。鈉鹽在血液中的溶解度低于鉀鹽。鋰鹽的血漿可作鉀和鈉的測(cè)定。乙二胺四乙酸二鋰作為抗凝劑的用量是0.84毫克抗凝1毫升血(最低用量是0.52毫克)。將乙二胺四乙酸二鋰2*1克溶于10%甲醇水溶液100毫升中,分裝于試管。每管放入,0.2毫升(=4.2毫克)。置于160攝氏度烘箱內(nèi)30分鐘使甲醉完全蒸發(fā),可抗凝5毫升血液,供作一般常規(guī)血液化學(xué)測(cè)定用。使用抗凝劑時(shí),應(yīng)根據(jù)其生化性質(zhì)和抗凝能力恰當(dāng)選擇??鼓齽┡c血液之?dāng)?shù)M比例要適當(dāng),不要過(guò)多或過(guò)少。如抗凝劑數(shù)量不足,則部
肝素的作用肝素(Heparin)使用少雖的肝素即可抗凝,且不影響血液內(nèi)各種成分的化學(xué)分析,為極佳的抗凝劑?1毫克的肝素可抗凝50毫升的血液(有的可抗凝100毫升血液,這決定于肝素制劑的純度〉。用時(shí)先配成1毫升1毫克肝素的水溶液,每試管加0.1毫升,置于80攝氏度烘箱烘干,干后加塞備用,可使5?10毫升血液不凝固(市售品多為肝素衲溶液,每毫升含肝素12,500國(guó)際單位,相當(dāng)于100毫克。故125國(guó)際單位相當(dāng)于1毫克,使用時(shí)可按此計(jì)算)。肝素的抗凝作用是抑制血液中凝血酶元轉(zhuǎn)化為凝血酶,因此纖維蛋白原不能轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。但肝素僅可在一定時(shí)間內(nèi)防止血液凝固,此持續(xù)時(shí)間決定于加入肝素的質(zhì)量和數(shù)量。水蛭素也可用作抗凝劑,將幾個(gè)水蛭頭放入灑褚內(nèi),然后將其干燥,研成粉末。1份粉末加入1%氯化鈉
草酸鉀就一種白色晶體,草酸鉀可以溶于水中。性質(zhì)草酸鉀化學(xué)式 K2C2O4外觀 白色晶體密度 2.13g·cm-3草酸鉀是鉀的草酸鹽,草酸鉀化學(xué)式為K2C2O4。草酸鉀的作用草酸鉀與血中的鈣離子作用成夢(mèng)酸鈣沉淀,而使血液不凝固。草酸鉀10?20毫克可抗凝10亳升血液。使用方法:通常取5%草酸鉀溶液0.2毫升。放入試管中,在100攝氏度以下的烘箱烘干,則草酸鉀成粉末留存于管底。此管可作盛血5毫升之用。另一方法是用液體抗凝,20%草酸鉀溶液1滴放入試管中,不須經(jīng)干燥過(guò)程,可抗凝5毫升血液。液體抗凝雖有輕度血液稀釋,不過(guò)稀釋甚微,可
蛋白紙上電泳的注意事項(xiàng)血清蛋白電泳的影響因素較多,因此要得到重復(fù)性高的結(jié)果,操作條件要力求一致,注意操作的細(xì)節(jié)。一、 濾紙盡量要采用同一品種、同一批號(hào)。濾紙選擇要求①質(zhì)地厚,②對(duì)蛋白吸附力??;③對(duì)染料吸附力小,濾紙空白色淺,④濾紙條應(yīng)順紋剪裁。二、 血淸用毋要恒定,壬要過(guò)多。如用量過(guò)多,電泳圖譜可能分離不清楚。且蛋白與染料結(jié)合不呈平行,染色后白蛋白比例減少。三、 通電后負(fù)極和正極兩端的綏沖液氫離子濃度略有改變,故應(yīng)每次電泳后,將電極調(diào)換位置,并在一定時(shí)間內(nèi)全部緩沖液混勻過(guò)濾。滅少污染,控制水分蒸發(fā)和離子強(qiáng)度的改變,對(duì)電極上沉積的結(jié)晶及時(shí)處理,這樣可延長(zhǎng)其使用時(shí)間。在
影響蛋白電泳的因素一個(gè)帶電的蛋白質(zhì)分子,其所以能在電場(chǎng)中移動(dòng)以及其具有一定的移動(dòng)速度,取決于其本身所帶的電荷、電場(chǎng)強(qiáng)度、溶液的PH、粘度和電滲等因索的影響。一、帶電質(zhì)點(diǎn)所帶電荷:如上所說(shuō)蛋白質(zhì)由于綏沖液PH的不同,所帶的電荷可正可負(fù),在電場(chǎng)里向相反的電極移動(dòng)。溶液的PH值離等電點(diǎn)越遠(yuǎn),則移動(dòng)的速度越快。蛋白質(zhì)分子小而帶電多者,移動(dòng)速度較快。分子大而帶電少者移動(dòng)較慢。 二、電場(chǎng)強(qiáng)度:電場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)電泳速度也起決定的作用,所謂電場(chǎng)強(qiáng)度是每一厘米的電位降。例如濾紙電泳時(shí),濾紙兩端長(zhǎng)為20厘米,測(cè)得的電位降為200伏特。則電場(chǎng)強(qiáng)度為200+20=10伏特/厘米。電場(chǎng)強(qiáng)度愈大,則帶電質(zhì)點(diǎn)移動(dòng)愈快。三、溶液的離子強(qiáng)度:溶液的離子強(qiáng)度越高,則蛋白質(zhì)移動(dòng)的速度
聚丙烯酰胺凝膠電泳和醋酸纖維薄膜電泳簡(jiǎn)介一、聚丙烯酰胺凝膠電泳:由于被電泳的物質(zhì)在圓柱形的支持物中電泳,形成不連續(xù)的圓盤形區(qū)帶,因而亦稱圓盤電泳。聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成的凝膠,是丙烯酰胺單體(ch2=chconh2>和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺(ch2=chconhch2nhcoch=ch2)在催化劑的作用下聚合而成的一種凝膠。經(jīng)聚合后的凝膠有一定的孔徑大小,而且這孔徑可以調(diào)節(jié),以適應(yīng)各種不同電泳物的需要。因此聚丙烯酰胺電泳有分子篩和電泳的雙重作用,因而能將蛋白質(zhì)較細(xì)地分離。如人血淸蛋白紙上電泳可分成5?7個(gè)組分,聚丙烯酰胺凝膠電泳則可分成20?30個(gè)組分。在操作過(guò)程中較其他電泳方法為復(fù)雜,目前一般的臨床檢驗(yàn)室使用尚少。但它具有高度的分辨能力,在醫(yī)療診斷上有一定的發(fā)展前途。
電泳儀的作用及工作原理電泳儀有低壓、中壓、高壓三種類型,臨床實(shí)驗(yàn)室常用的為低壓電泳儀。它的構(gòu)造,主要由直流電源和電泳槽兩部分組成。.直流電源:其裝置的主體是一個(gè)整流器。電泳是需用直流電,因此220伏交流市電經(jīng)整流器變?yōu)橹绷麟娫?。一般?duì)直流電源的要求是能夠輸出0?300伏的可調(diào)直流電壓。電壓需要穩(wěn)定。電流輸出可根據(jù)實(shí)際需要來(lái)設(shè)汁。例如用于紙上電泳需電流較小,瓊脂電泳需電流較大。一般設(shè)計(jì)最大輸出電、流在200毫安以上。交、流電轉(zhuǎn)為直流電可用電子管整流或晶體整流或可控硅整流。電泳儀是用可控硅整流,它具有體積小重跫輕,輸出電壓可隨意調(diào)節(jié)和輸出電功率大的優(yōu)點(diǎn)。電泳槽的大小可結(jié)合實(shí)際使用。但要考慮:1.液體容積不宜過(guò)小,因級(jí)沖液用量過(guò)少,其值易于改變。2.緩沖液面不宜過(guò)
蛋白質(zhì)電泳的基本原理電泳不但應(yīng)用于蛋白質(zhì)的分離與含量的測(cè)定,而且在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中有許多新的應(yīng)用。例如:診斷乙型肝炎的乙型肝炎抗原(HBAg)的電泳測(cè)定>診斷原發(fā)性肝癌的甲胎蛋白(AFP>的電泳測(cè)定等等。將兩個(gè)白金電極放在氯化鈉溶液中,通上直流電,則兩電極間形成一個(gè)恒定的電場(chǎng)。溶液中帶正電荷的Na+向負(fù)極移動(dòng),帶負(fù)電荷的cr向正極移動(dòng)。結(jié)果在負(fù)極得到NaOH,在正極得到Cl2。這現(xiàn)象是大家熟悉的,叫做電解。膠體質(zhì)點(diǎn)(如蛋白質(zhì)分子)的表面也帶有電荷。由于電荷的存在,通電時(shí),膠體質(zhì)點(diǎn)就能向電場(chǎng)一極移動(dòng)。這種現(xiàn)象叫做電泳。事實(shí)上,不管離子也好,膠體質(zhì)點(diǎn)也好,這種在電場(chǎng)的影響下移動(dòng)的現(xiàn)象,在本質(zhì)上是沒有區(qū)別的,不過(guò)名稱不同而已。一般臨床檢驗(yàn)室對(duì)電泳的應(yīng)用,主要還是蛋白質(zhì)的檢定。
弱電解質(zhì)在溶液中的電離平衡和常敗HCl、HNO3是強(qiáng)酸,KOH、NaOH是強(qiáng)驗(yàn),都是強(qiáng)電解質(zhì),其電離情況如上面所述。現(xiàn)在談一談弱電解質(zhì)的電離情況。在溶液中僅部分電離的這類化合物叫做弱電解質(zhì)。常見的有弱酸如硼酸(H3BO3)、醋酸(CH6COOH)、草酸(h2c2o4)碳酸(H2co3)等;弱堿如氫氧化銨(NH4OH)等;鹽類如氣化高汞(HgCl2)、氯化鎘(CdCl2)等。一般來(lái)說(shuō),強(qiáng)電解質(zhì)在水溶液中幾乎是完全電離的,所以強(qiáng)電解質(zhì)在水溶液中都是以離子狀態(tài)存在。而弱電解質(zhì)的情況就不一樣,弱電解質(zhì)在水溶液中除有離子存在外,還有未電離的分子。 比如醋酸(CH3COOH)在水溶液中,—方面CH3COOH分子電離產(chǎn)生H+和CH3COC-。這個(gè)過(guò)程稱為正過(guò)程(正反應(yīng))。另一方面,電離出來(lái)的